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什么是ELISA？

更新時間：2025-10-09

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說清楚四種ELISA及其應用

什么是ELISA？

酶聯免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一種基于抗原-抗體特異性反應的免疫學檢測技術，用于對樣本中特定物質的進行定性和定量分析，也用于抗體開發過程中的抗體篩選，是抗體高通量篩選的基石。

ELISA技術的核心主要有兩點：抗體與抗原的特異性結合和酶標信號放大效應。

常見的ELISA類型主要有四種：直接ELISA、間接ELISA、雙抗夾心ELISA和競爭ELISA。

直接法ELISA（Direct ELISA）

直接法ELISA是很簡單的ELISA，通過酶標一抗直接與靶標抗原結合，顯示信號；對直接標記的一抗要求高，無需二抗，一般用于初步篩選和快速檢測。

直接法雖然速度快，但是通常情況下會產生高背景、檢測靈敏度較低、容易產生非特異性結合；因此主要用于初步篩選和快速檢測。

間接法ELISA（Indirect ELISA）

間接法ELISA先用一抗識別并結合靶標抗原，然后通過酶標二抗產生并放大信號來檢測靶標樣品；與直接法相比，多了酶標二抗的孵育結合，時間上要比直接法長，但是檢測靈敏度提高了，不需要直接標記的一抗，對一抗的要求也沒有那么高。

檢測法主要用于病原體抗體檢測和診斷，疫苗接種后抗體評價，以及抗體開發過程中抗體的篩選。

雙抗夾心ELISA（Sandwich ELISA）

雙抗夾心法是指通過捕獲抗體和檢測抗體分別結合同一個抗原的不同表位，形成“雙抗夾心三明治"結構，捕獲抗體抓取樣品中的靶標抗原，酶標檢測抗體產生信號，計算靶標抗原的含量。

雙抗夾心ELISA大分子檢測中常用的方法，它的檢測特性好、靈敏度高，適合用于復雜樣品中靶標蛋白的檢測，在體外診斷、科研樣品檢測中被廣泛地應用；它幾乎是檢測低豐度靶標蛋白的金標準方法。

競爭法ELISA（Competitive ELISA）

競爭法ELISA是指通過待檢測抗原與標記抗原競爭結合有限抗體分子，信號強度與待檢測抗原濃度成反比（待測抗原濃度越高，信號越小；待測抗原濃度越低，信號越高）的一種ELISA技術，主要用于檢測小分子抗原。

競爭法ELISA一般是將抗體固定在固相載體上，封閉之后，同時加入待測樣品（含待測抗原）和酶標抗原（已知濃度），兩者競爭結合有限的包被抗體，待測抗原含量越高，酶標抗原結合越少，信號就越弱。

競爭法ELISA適合用于小分子抗原的檢測，主要用于食品安全藥物殘留、抗生素殘留、霉菌毒素檢測，體外診斷，環境檢測等。

這里順便說一下，競爭法ELISA也可以包被抗原，用來檢測樣品中抗體的濃度。

娜連生物總結：常見的ELISA主要有四種：直接法ELISA、間接法ELISA、雙抗夾心法ELISA和競爭法ELISA，雙抗夾心ELISA主要用于蛋白抗原的檢測，競爭法ELISA主要用于小分子的檢測，直接法ELISA和間接法ELISA主要用于初篩檢測和抗體篩選。