精準(zhǔn)量化膽固醇代謝的關(guān)鍵工具——小鼠膽固醇7α羥化酶試劑盒解析?
更新時(shí)間:2025-10-20
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小鼠膽固醇7α羥化酶(CYP7A1)試劑盒是基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)研發(fā)的重要科研工具,專注于定量檢測(cè)小鼠樣本中CYP7A1的表達(dá)水平。該酶由肝臟細(xì)胞合成,催化膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸,是膽固醇代謝的核心調(diào)控因子。以下是對(duì)該試劑盒的詳細(xì)介紹:
技術(shù)原理與結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)?
本試劑盒采用雙抗體夾心法進(jìn)行檢測(cè)。預(yù)先包被的特異性抗體捕獲樣本中的CYP7A1抗原,隨后加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成復(fù)合物,再通過(guò)親和素-辣根過(guò)氧化物酶(HRP)放大信號(hào)。最終加入底物顯色,通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度,實(shí)現(xiàn)高靈敏檢測(cè)。板內(nèi)變異系數(shù)嚴(yán)格控制在一定比例以內(nèi),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。
技術(shù)特點(diǎn)與性能優(yōu)勢(shì)?
高靈敏度與寬檢測(cè)范圍:典型檢測(cè)范圍為0.31-20ng/mL,可準(zhǔn)確量化微量表達(dá);
高特異性:經(jīng)驗(yàn)證與其他相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng),適合復(fù)雜樣本檢測(cè);
多樣本適用性:支持血清、血漿、細(xì)胞上清等多種樣本類型,滿足不同科研場(chǎng)景需求;
便捷高效:提供96T/48T兩種規(guī)格,適配高通量篩選;多數(shù)廠商提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),縮短科研周期。
實(shí)驗(yàn)操作與注意事項(xiàng)?
操作流程主要包括準(zhǔn)備試劑、包被、洗滌、加樣、溫育、再加酶標(biāo)記物、洗滌、加底物、終止反應(yīng)和讀數(shù)等步驟。使用時(shí)需注意以下關(guān)鍵點(diǎn):一是試劑應(yīng)按規(guī)定溫度保存,使用前恢復(fù)至室溫;二是避免重復(fù)使用標(biāo)準(zhǔn)品,充分混勻反應(yīng)體系;三是嚴(yán)格遵循洗滌步驟,減少非特異性結(jié)合;四是控制溫育時(shí)間和溫度,保證結(jié)果準(zhǔn)確性。
科研應(yīng)用與價(jià)值?
該試劑盒廣泛用于代謝性疾病研究,通過(guò)檢測(cè)CYP7A1活性可評(píng)估膽固醇向膽汁酸轉(zhuǎn)化效率,揭示膽結(jié)石、高膽固醇血癥等疾病的發(fā)病機(jī)制。此外,還可應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域,篩選能夠調(diào)節(jié)CYP7A1活性的新型降脂藥物。
總之,小鼠膽固醇7α羥化酶試劑盒憑借其高靈敏度、高特異性和廣泛的樣本適用性,已成為研究膽固醇代謝機(jī)制的重要工具。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用需求的增加,該試劑盒將在更多領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,推動(dòng)相關(guān)疾病的研究和治療取得新的突破。