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牛ELISA試劑盒
牛蛋氨酸(Methionine)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品分類
產(chǎn)品名稱:牛蛋氨酸(Methionine)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T 可拆
保 質(zhì) 期:6個(gè)月
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附法
適用物種:大鼠/小鼠/動(dòng)物/植物等
主要用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測(cè)各種指標(biāo)。
樣本類型:血清、血漿、細(xì)胞上清等液體樣本
貯存方法:試劑盒未拆開(kāi),4℃保存。已拆開(kāi),標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,其它4℃保存。
樣本體積:50μl
牛蛋氨酸(Methionine)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng):
1. 混合蛋白質(zhì)溶液時(shí),應(yīng)始終避免起泡。為了避免交叉污染,在添加每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和試劑時(shí)應(yīng)更換移液器槍頭。此外,每種試劑應(yīng)單獨(dú)使用容器。
2. 確保試劑不間斷地添加到板孔中。為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果,在孵育步驟中需要粘合好封板膜。
3. 當(dāng)使用自動(dòng)洗板機(jī)時(shí),在加入洗滌緩沖液后加入30秒的浸泡期,或者在洗滌步驟之間將板旋轉(zhuǎn)180度,可以提高測(cè)定精度。
顯色劑應(yīng)保持無(wú)色,直到添加到板中。確保顯色劑不受光線照射。顯色劑應(yīng)從無(wú)色變?yōu)樗{(lán)色。
4. 應(yīng)按照與顯色劑相同的順序?qū)⒔K止液添加到板中。加入終止液后,孔中形成的顏色將從藍(lán)色變?yōu)辄S色。綠色的孔表示終止液未與基質(zhì)溶液充分混合。

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